Diol二醇基色譜柱是硅膠填料的替代物,與相應的硅膠填料相比,它的平衡時間更短,而選擇性相似。由于這種填料的活性較低,它還可以應用在體積排阻色譜中。二醇基柱主要可用于多肽、蛋白以及極性藥物分子等的分離。
二醇基結合色譜柱在正相系的分析中,可以獲得高于色譜柱的保留容量。且由于其化學鍵合了與硅膠有著不同性質的羥基,因此在正相分析下,其填充劑的選擇范圍相對更大采用了*的化學處理技術,從而實現了穩定的化學修飾。
為此,其同樣可以放心地使用于正相制備HPLC中。此外,與硅膠有所不同的是,由于它可以通入水洗提液,因此能夠較容易地清洗掉吸附于色譜柱上的極性雜質成分。
Diol二醇基色譜柱平時在反相條件下使用:
緩沖鹽應及時沖洗,以及不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等,屬常識就不作特別交待了。
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用50倍純甲醇沖洗;之后,用異丙醇過渡后,用二氯甲烷沖洗色譜柱;之后,再用異丙醇過渡回來到甲醇條件下。
這些清洗方法,主要是針對當樣品中有雜質逐步吸附累積到填料上時的處理方法,色譜柱表現行為為諸如柱壓增高柱效降低等。
其他一些通用小技巧如調轉柱子低流速沖洗,在污染物累積在柱頭時是比較有效的,不再贅述。
最后,仍然建議:在實驗室中做好定期柱效檢測工作,是重要而有意義的。